PDH, hayvanlarda, bitkilerde, mikroorganizmalarda ve kültür hücrelerinde yaygın olarak bulunan bir enzimdir ve pirüvat dehidrogenaz kompleksi (PDHC) tarafından katalize edilen asetilformik asidin oksidatif dekarboksilasyonundaki hız sınırlayıcı enzimdir. Asetilformik asidin dekarboksilasyonu sonucu hidroksietil-TPP oluşur ve bu reaksiyon glikolizi trikarboksilik asit döngüsüne bağlar.

PDH, asetilformik asidin dehidrojenasyonunu katalize eder ve bu süreçte 2,6-diklorofenol indofenolün (2,6-DCPIP) indirgenmesini sağlayarak 605 nm dalga boyundaki absorbansı azaltır.